標本DNA的分離與純化

用5-10ml 1xNTE(NaCl 100mmol/L ,Tris-HCl 10mmol/l pH7.4，EDTa 1mmol/L pH8.0)調整細胞為2×107個（組織應切碎置液氮冰凍，高速攪切成粉末后，加入緩沖液）。加1/10-1/20體積（V）10mg/ml蛋白酶（Sigma Ⅷ型），1/20v 10％SDS，37℃2小時。加等量酚/3xNTE(3xNTE上封)混勻（至少7分鐘）。4℃，3000rpm，10分鐘。取上清液，加2ml TE(Tris-HCl 10mmol/L pH7.5，EDTa 1mmol/L pH8.0)，充分混勻。乙醇沉淀。2mlTE溶解沉淀。加1/30xNTE，蛋白酶K(10mg/ml)代替蛋白酶重復2-4步驟。測定含量。