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    分泌型IgA的分離與鑒定

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

    (一)材料與試劑
    1.初乳
    2.SephadexG200
    3.0.10Mol/L pH6.8PB液
    4.0.01Mol/L pH7.4PB液
    5.DEAE52
    (二)操作方法
    1.取初乳20ml,10 000rpm離心10min,棄去表面脂肪層及底部的沉淀物。
    2.取乳清過SephadexG200柱(柱規(guī)格為2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脫,第一峰為IgA(含IgG)。
    3. 收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
    4. 將透析液濃縮至5mg/ml以上。
    5. 過DE52層析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脫,洗下蛋白峰為IgG,棄去。
    6. 換用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脫,
    收集洗脫液 ,即為較純的IgA液。
    7. 必要時,可再過一次SephadexG200柱。
    8. 濃縮,鑒定

     

     
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