中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶活性組織化學(xué)檢查法

１　試劑
　　ａ．固定液：加甲醛１０ｍｌ于無水甲醇９０ｍｌ中。
　　ｂ．緩沖底質(zhì)液（須臨用時配制）：由１０％巴比妥鈉３０ｍｌ、３．２％β－甘油磷酸鈉３０ｍｌ、Ｍ／１０硫酸鎂３０ｍｌ、２％硝酸鈣４５ｍｌ及蒸餾水１６５ｍｌ配成。
　　ｃ．清洗液：在蒸餾水中加幾滴２％硝酸鈣液。
　　ｄ．２％硝酸鈷。
　　ｅ．稀硫化銨液：硫化銨１ｍｌ加水至８０ｍｌ。
　　ｆ．２％堿性藏紅水溶液。
２　方法
　　ａ．指端取血推片，不宜太薄。
　　ｂ．迅速將血片置固定液中固定３０秒，然后用清洗液洗數(shù)秒鐘。
　　ｃ．將已固定的血片放于緩沖底質(zhì)液內(nèi)，在３７℃水浴中保溫２小時，然后用清洗液洗數(shù)秒鐘。
　　ｄ．將上述血片依次放入２％硝酸鈷液中５分鐘，用清洗液洗凈，然后移于稀硫化銨液中１分鐘，用清洗液洗凈，最后用２％堿性藏紅水溶液染色１６秒，用水洗凈，待干，用顯微鏡油鏡觀察結(jié)果。
３　計(jì)算方法
　　共計(jì)數(shù)１００個中性粒細(xì)胞，視其細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活力強(qiáng)弱，按Ｋａｐｌｏｗ法五級記分表示。將每級陽性細(xì)胞百分比乘以各該級的分?jǐn)?shù)所得分?jǐn)?shù)之和，即為堿性磷酸酶的積分。分級的標(biāo)準(zhǔn)如下：
　　ａ．中性粒細(xì)胞胞漿無異常著色或顆粒，為０分。
　　ｂ．胞漿內(nèi)呈彌散的淺棕色，或少許細(xì)微顆粒，為１分。
　　ｃ．胞漿內(nèi)有棕色散在顆粒，為２分。
　　ｄ．胞漿內(nèi)有分布不均勻的棕黑色顆粒，為３分。
　　ｅ．胞漿內(nèi)充滿了均勻一致的棕黑色顆粒，或塊狀沉淀，為４分。