臍帶內皮細胞的分離

⑴?臍帶收集：用無菌止血鉗夾閉臍帶兩端，在止血鉗外側剪斷臍帶，放入盛有4℃Cord Buffer的飯盒內。臍帶在4℃放置不應超過24小時。
⑵ 臍帶內皮細胞分離
　　帶無菌手套，取出臍帶，在止血鉗內側用碘酒和酒精棉球消毒后，用無菌剪刀將兩端臍帶剪除。
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在臍帶一端找到靜脈，插入臍帶靜脈插管，用2根粗絲線扎牢，用Cord Buffer抽吸有的30ml注射器沖洗靜脈腔，至將臍血洗凈。
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　　 趕出靜脈腔內殘余液體，將臍帶另一端用止血鉗夾閉，用10ml注射器連接針頭，注入37℃預熱的0.1％膠原酶約6-8ml，放入37℃Cord Buffer中保溫6-10min
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　　吸出靜脈腔內膠原酶所消化的細胞懸液，加入預加有20mlcordBuffer的離心管中，沖洗靜脈腔，一并加入離心管中。
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離心，1500rpm,10min棄上清，用5～7ml 20％FCS，RPMT 1640重懸細胞，轉入培養瓶，放5％CO2孵箱