ISNT的流式細(xì)胞儀分析

1．離心收集細(xì)胞，PBS洗1～2次
2．1％多聚甲醛低溫下固定15min。
3．3ml PBS洗1次，70％乙醇固定，冰箱內(nèi)放置1～3天。
4．PBS輕洗1次。
5．2×105細(xì)胞與12.5μl的缺口平移緩沖液在15℃共孵育6h，每過15min振動1次。
6．PBS輕洗1次。
7．細(xì)胞在黑暗中37℃與100μl的染色緩沖液孵育30min。
8．含0.1％ Triton-X 100的PBS輕洗1次。
9．1ml PBS（含5mg/ml PI, 0.1% RNase A）重懸。
10．流式細(xì)胞儀分析紅色（PI）對綠色熒光（FITC）的地形圖。