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    分子生物一線實(shí)驗(yàn)人員軟件解決方案(1999版)

    放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

    在互聯(lián)網(wǎng)上,有很多軟件可以解決分子生物實(shí)驗(yàn)人員從立項(xiàng)到最后寫(xiě)論文的實(shí)際問(wèn)題。本文提供了對(duì)相同作用的很多軟件進(jìn)行比較后推薦給一線實(shí)驗(yàn)人員使用的Windows軟件。
    一、資料收集整理階段。本階段需要查找某個(gè)專(zhuān)題的文章,并寫(xiě)出對(duì)該專(zhuān)題的綜述,以便對(duì)自己所要做課題的現(xiàn)狀有一個(gè)基本的了解。
    推薦軟件:Reference Manager 9.0
    優(yōu)點(diǎn):可以在線通過(guò)查找關(guān)鍵詞搜索PubMed和609個(gè)Z39.50數(shù)據(jù)庫(kù)中的專(zhuān)業(yè)資料,保存查找的資料為本地文件。資料內(nèi)容和記錄分上下兩個(gè)屏幕,如有全文或想連接網(wǎng)絡(luò)時(shí)點(diǎn)擊一個(gè)鍵就可以到相應(yīng)的全文文章和摘要。可以直接在WORD中查找資料,插入引用,并在文章中對(duì)引用格式化,引用的參考資料格式有很強(qiáng)的用戶(hù)自定義功能,可以符合各種雜志對(duì)引用格式的要求,引用時(shí)不用多窗口切換。也可以作為本地資料管理軟件。
    缺點(diǎn):沒(méi)有非常明顯的缺點(diǎn)。
    同類(lèi)參考軟件:Endnote 3.1.2

    二、序列分析、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段。本階段包括限制酶分析、引物設(shè)計(jì)、同源序列比較、質(zhì)粒作圖、結(jié)構(gòu)域(motif)查找、RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析、克隆策略圖譜、三維結(jié)構(gòu)顯示等方面的內(nèi)容。
    1、 綜合性軟件。這類(lèi)軟件要求對(duì)本階段上述的大部分功能均具備,但這類(lèi)軟件大多在專(zhuān)項(xiàng)分析上沒(méi)有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。
    推薦軟件:Omiga 2.0
    優(yōu)點(diǎn):你所能想到的對(duì)核酸蛋白的序列分析功能,它大多具備,而且有很舒適的表達(dá)方式。不喜歡裝備各種專(zhuān)業(yè)性強(qiáng)的軟件、而希望用一個(gè)綜合性的軟件代替的實(shí)驗(yàn)人員可以選擇本軟件。本階段的大部分功能它都有。另外,該軟件還提供了多個(gè)很有特色的序列分析功能,如有類(lèi)似于核酸限制酶分析的蛋白分析,對(duì)蛋白進(jìn)行有關(guān)的多肽酶處理后產(chǎn)生多肽片段。
    缺點(diǎn):文件實(shí)在太大了。要完全下載所有有關(guān)軟件的話(huà),需近30M,而且每個(gè)功能并不十分完美,只能說(shuō)可以解決問(wèn)題。而且要掌握并靈活運(yùn)用并不是簡(jiǎn)單的事。
    同類(lèi)參考軟件:Vector NTI Suite 5.5 DNASIS 2.5
    2、 限制酶分析。可能是最簡(jiǎn)單的功能了,其實(shí)我們用普通的文本搜索也能找出相應(yīng)的序列位點(diǎn)。不過(guò),正因?yàn)槿绱耍晕覀兿M浖诮Y(jié)果輸出上有更完美的表現(xiàn)。
    推薦軟件:DNAssist 1.0
    優(yōu)點(diǎn):雖然能進(jìn)行限制酶分析的軟件多如牛毛,但可以說(shuō)本軟件幾乎是唯一合格的限制酶分析軟件。原因是大多軟件只對(duì)線性序列進(jìn)行分析,那么cNNNNN…NNNgaatt環(huán)狀的序列就找不到EcoR I的位點(diǎn)。而這個(gè)軟件是唯一能非常簡(jiǎn)單地達(dá)到這個(gè)目的把這個(gè)EcoR I位點(diǎn)找出來(lái)的軟件。另外DNAssist在輸出上非常完美,除了圖形、線性顯示外,還有類(lèi)似DNASIS的列表方式,列出有的位點(diǎn)(按酶排列,按堿基順序排列)、沒(méi)有的位點(diǎn)。可以說(shuō)限制酶分析上該軟件是當(dāng)之無(wú)愧的冠軍。
    缺點(diǎn):顯示結(jié)果是黑白的,不是非常亮麗。而且本軟件在限制酶管理上有一個(gè)錯(cuò)誤(bug)。
    同類(lèi)參考軟件:Primer Premier 4.11 其他多種軟件
    3、 引物設(shè)計(jì)。由于引物設(shè)計(jì)大多在原來(lái)的序列上設(shè)計(jì),因此能否對(duì)假定的引物進(jìn)行各種屬性的分析,參考各種結(jié)果,最后找到合適的引物序列便成為選擇軟件的最關(guān)鍵。
    推薦軟件:Primer Premier 4.11
    優(yōu)點(diǎn):顧名思義,該軟件就是用來(lái)進(jìn)行引物設(shè)計(jì)的。可以簡(jiǎn)單地通過(guò)手動(dòng)拖動(dòng)鼠標(biāo)找到擴(kuò)增出相應(yīng)片段所需的引物。在手動(dòng)的任何時(shí)候,下面顯示各種參數(shù)的改變和可能的二聚體、異二聚體、發(fā)夾結(jié)構(gòu)等。也可以給定條件,讓軟件自動(dòng)搜索引物,并將引物分析結(jié)果顯示出來(lái),而且進(jìn)行這些操作非常簡(jiǎn)單。
    缺點(diǎn):沒(méi)有明顯缺點(diǎn)
    同類(lèi)參考軟件:DNAClub Oligo 5.0
    4、 同源序列比較。與限制酶分析相似,由于這類(lèi)軟件的內(nèi)核大都是相同的。所以其結(jié)果輸出和易用性也成了更重要的標(biāo)準(zhǔn)。
    推薦軟件: GeneDoc 3.2
    優(yōu)點(diǎn):用亮麗的色彩來(lái)區(qū)分相互間序列的同源性,輸出的格式一目了然,而且可以報(bào)告為進(jìn)化樹(shù)的格式。選擇項(xiàng)多,可以達(dá)到所需的要求。
    缺點(diǎn):要完全掌握,并不是很輕松的事。
    同類(lèi)參考軟件:MACAW 2.05 Blast等
    5、 質(zhì)粒作圖。與限制酶分析一樣,這也是最常用的功能。很顯然,要求軟件能對(duì)已知序列自動(dòng)作圖,對(duì)未知序列但關(guān)鍵部位位置清楚的質(zhì)粒也能作圖。主要是標(biāo)示各種酶切位點(diǎn)、基因序列、特定結(jié)構(gòu)域序列。
    推薦軟件:Gene Construction Kit 2.0β3
    優(yōu)點(diǎn):符合上述對(duì)質(zhì)粒作圖的所有要求,而且做出來(lái)的圖可以用到下面要講到的克隆策略圖譜中去。
    缺點(diǎn):使用實(shí)在太不方便了。
    參考軟件:Winplas 2.6 pDRAW32 1.0.33 等
    6、 結(jié)構(gòu)域(motif)查找。與限制酶的分析相似,這也是一個(gè)文本查找的內(nèi)容,關(guān)鍵在于以何種方式顯示查詢(xún)結(jié)果。
    推薦軟件:Primer Premier 4.11
    優(yōu)點(diǎn):該軟件在結(jié)構(gòu)域查找方面和限制酶查找一樣,結(jié)果以圖形、表格、序列三種方式提供,而且提供了不存在的結(jié)構(gòu)域列表。軟件本身提供了大量的結(jié)構(gòu)域序列。
    缺點(diǎn):對(duì)于環(huán)狀的序列也無(wú)法解決末端結(jié)構(gòu)域的查找問(wèn)題(與限制酶分析類(lèi)似)。
    其他參考軟件:沒(méi)有很出色的競(jìng)爭(zhēng)軟件
    7、 序列查找下載工具。
    推薦軟件:Network Entrez
    優(yōu)點(diǎn):該軟件是一個(gè)客戶(hù)端程序,需在聯(lián)網(wǎng)時(shí)使用,可以查詢(xún)核酸、蛋白、基因、三維結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù),將原來(lái)分散的不同站點(diǎn)的序列查詢(xún)集中在一起。
    缺點(diǎn):對(duì)實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),還不是能簡(jiǎn)單上手的。而且如果不上網(wǎng)的話(huà),還真是一點(diǎn)用處也沒(méi)有。軟件作用太專(zhuān)一了。而且所有的功能在相應(yīng)網(wǎng)站上也有。
    其他參考軟件:無(wú)
    8、 RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及分析。這類(lèi)軟件在windows下用的比較少。而且人們?cè)诙?jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方面也沒(méi)有什么明確的模型。因此,對(duì)這類(lèi)軟件只能以參考參考的心態(tài)來(lái)使用了,不能報(bào)任何希望。
    推薦軟件:RNAdraw 1.1b2
    優(yōu)點(diǎn):軟件真可謂短小精悍,如此小的軟件,竟然能將我們想知道的各種參數(shù)計(jì)算出來(lái)。與其競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手RNAStructure 3.5 相比,功能并沒(méi)有少了什么。
    缺點(diǎn):大多數(shù)功能通過(guò)右鍵彈出菜單進(jìn)行,對(duì)普通人員不太慣。
    參考軟件:RNAStructure 3.5
    9、 蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析。不要指望軟件能給你帶來(lái)一個(gè)有三維結(jié)構(gòu)的蛋白。所謂的分析只能給你一個(gè)蛋白某些片段有形成什么結(jié)構(gòu)的趨向。結(jié)果還是要靠人本身。
    推薦軟件:Antheprot 4.5
    優(yōu)缺點(diǎn):由于沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手,難以比較,實(shí)在無(wú)所謂優(yōu)缺點(diǎn)了。該軟件能夠提供蛋白序列的一些二級(jí)結(jié)構(gòu)信息,以便于我們對(duì)未知結(jié)構(gòu)蛋白的結(jié)構(gòu)做個(gè)假想。
    參考軟件:沒(méi)有
    10、 克隆策略圖譜。幾乎所有人都用手工或用繪圖軟件來(lái)畫(huà)出整個(gè)克隆過(guò)程,各種位點(diǎn)只能大概估計(jì),與核酸的序列之間的關(guān)系當(dāng)然無(wú)從談起。現(xiàn)在終于有可以解決問(wèn)題的軟件登陸了。
    推薦軟件:Gene Construction Kit 2.0β3
    優(yōu)點(diǎn):可以將載體與目的基因各自進(jìn)行適當(dāng)?shù)南拗泼盖泻煤螅B接成新的載體-基因。可以將整個(gè)克隆過(guò)程用圖示方式表示出來(lái)。可以根據(jù)適當(dāng)?shù)膶?duì)照標(biāo)準(zhǔn)(marker)將電泳圖畫(huà)出來(lái),而且可以和掃描的實(shí)際電泳結(jié)果對(duì)照。整個(gè)過(guò)程相當(dāng)于模擬一個(gè)克隆過(guò)程。提供了一個(gè)相當(dāng)詳細(xì)的教學(xué)文件。更何況如前所述,它還是一個(gè)優(yōu)秀的質(zhì)粒作圖軟件。
    缺點(diǎn):要使用它,實(shí)在需要重新學(xué)習(xí)。雖然使用較難,看在有詳細(xì)教學(xué)文件和功能急需及強(qiáng)大的份上,也是非常值得的。
    參考軟件:沒(méi)有
    11、 三維結(jié)構(gòu)顯示。用各種方法計(jì)算出來(lái)的各種三維結(jié)構(gòu)的數(shù)據(jù)只有在相關(guān)軟件幫助的情況下,才能顯示出其本來(lái)面目,使得我們對(duì)這些分子的結(jié)構(gòu)有一個(gè)直觀的體會(huì)。
    推薦軟件:RasMol 2.7.1
    優(yōu)點(diǎn):程序短小,功能強(qiáng)大。尚無(wú)在功能上出其右者。其顯示窗口可以很簡(jiǎn)單通過(guò)選擇相應(yīng)的菜單來(lái)顯示分子的三維結(jié)構(gòu)。用命令行窗口,通過(guò)輸入命令可以執(zhí)行和顯示復(fù)雜和要求極高的三維圖形。
    缺點(diǎn):在擁有強(qiáng)大功能的命令行窗口使用命令時(shí),需記住大量的命令,還要對(duì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)有了解,太難了,簡(jiǎn)直又進(jìn)入了DOS時(shí)代。
    參考軟件:ICMlite 1.0 Cn3D
    說(shuō)明:三維結(jié)構(gòu)顯示有一個(gè)軟件是瀏覽器插件,就是Chime 2.0 ,它與其他三維結(jié)構(gòu)顯示的作用有些不同,需與瀏覽器一起起作用。
    12、 格式轉(zhuǎn)換。各種軟件為了自己軟件的需要有不同的格式,對(duì)我們使用數(shù)據(jù)帶來(lái)了困難。可以通過(guò)格式轉(zhuǎn)換軟件互相交換數(shù)據(jù)。
    推薦軟件:Seqverter 1.3
    優(yōu)點(diǎn):使用簡(jiǎn)單,填寫(xiě)輸入文件和輸出文件名就可以完成格式轉(zhuǎn)換。而且能夠轉(zhuǎn)換的格式非常之多。可在線升級(jí)以讀寫(xiě)更多格式文件。
    參考軟件:Visual Sequence Editor 1.1
    13、 翻譯。
    推薦軟件:Gene Construction Kit 2.0 β3
    優(yōu)點(diǎn):可以自動(dòng)查找ORF并翻譯出蛋白序列,而且可以用實(shí)線框?qū)NA序列、蛋白序列、酶切位點(diǎn)等框起來(lái)用于文章寫(xiě)作,可以選擇不同的密碼子。
    缺點(diǎn):操作教難,與競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手Primer Premier 4.11相比,只有查找ORF和可以使用實(shí)線框的優(yōu)點(diǎn)。而后者操作簡(jiǎn)單,而且內(nèi)置很多不同種類(lèi)的密碼子。
    參考軟件:Primer Premier 4.11 其他多種軟件

    三、實(shí)驗(yàn)操作階段和分析。本階段由于各實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備和方法的不同差異太大,如若用到軟件,請(qǐng)參考機(jī)器配備之軟件。但也有一些共同的要求和使用的軟件。
    1、 電泳條帶定量分析。
    推薦軟件:BandScan 4.30
    優(yōu)點(diǎn):通用的電泳膠條帶定量分析軟件。可以手動(dòng)、自動(dòng)找到條帶,手動(dòng)的條帶可以是無(wú)規(guī)則的,可以清除背景。可以進(jìn)行分子量、百分比、質(zhì)量、波峰等方面的定量分析。可以直接使用掃描儀。可以將數(shù)據(jù)輸出到excel文件。
    缺點(diǎn):沒(méi)有明顯的大缺點(diǎn)。
    參考軟件:band leader 3.0
    2、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析作圖。可能在某些情況下需要用到這類(lèi)軟件。由于專(zhuān)業(yè)的統(tǒng)計(jì)軟件也很多,比較出色。我們只推薦一個(gè)比較適合生物的軟件GraphPad Prism 3.0

    四、文章寫(xiě)作和發(fā)表。本階段主要是對(duì)所獲得的結(jié)果進(jìn)行整理,并發(fā)表在合適的期刊雜志
    1、文獻(xiàn)引用。
    推薦軟件:Reference Manager 9.0
    優(yōu)點(diǎn):可以自動(dòng)將文章中的各種文獻(xiàn)引用按不同期刊的要求排列,在期刊間轉(zhuǎn)換只需幾秒鐘。寫(xiě)文章時(shí)會(huì)在word中將查找到相應(yīng)的文獻(xiàn)列出,方便寫(xiě)作。
    參考軟件:EndNote 3.1.2
    2、 生成發(fā)表質(zhì)量的圖片。發(fā)表時(shí),對(duì)用到的分子結(jié)構(gòu)的圖片質(zhì)量要求較高,直接從RasMol等軟件中截取的圖片質(zhì)量不夠精美。
    推薦軟件:Pov-Ray for Windows 3.1
    優(yōu)點(diǎn):軟件相當(dāng)于一種語(yǔ)言,修改pov格式文件,可以定義光源、攝像機(jī)、材質(zhì)、陰影等因素,把生物分子的表面用材質(zhì)填充,根據(jù)光源、攝像機(jī)得到分子三維圖的一個(gè)角度的圖。分辨率最大可達(dá)1280*1024。圖象質(zhì)量相當(dāng)精美。
    缺點(diǎn):難以使用。而且用的是自己的格式。好在有一個(gè)叫povchem的輔助軟件可以將最常見(jiàn)的pdb格式文件轉(zhuǎn)為pov格式。
    參考軟件:molmol 2.5.1 mole 1.1.8
    3、 序列遞交。要是結(jié)果中有新的序列需要遞交到各大數(shù)據(jù)庫(kù)中,格式必須符合各數(shù)據(jù)庫(kù)的要求。除了下面推薦的軟件外,也可以通過(guò)寫(xiě)好一種格式后,用格式轉(zhuǎn)換軟件轉(zhuǎn)換為其他種類(lèi)格式,以向不同的數(shù)據(jù)庫(kù)遞交序列。
    推薦軟件:Sequin 2.90
    優(yōu)點(diǎn):向GenBank、EMBL、DDBJ三大核酸序列庫(kù)遞交序列。可以不用仔細(xì)考慮各數(shù)據(jù)庫(kù)文件的具體格式,以問(wèn)答填表格的形式,將需遞交的序列和相關(guān)資料填好。可以在線直接發(fā)送,也可以生成相應(yīng)格式文件,以email形式發(fā)送。
    缺點(diǎn):一步一步填表的方式對(duì)新手固然好,但沒(méi)有高級(jí)使用的方式,可能用的多的人會(huì)覺(jué)得太死板。
    參考軟件:無(wú)
    五、我究竟要裝哪些軟件?
    很顯然,對(duì)于各個(gè)不同的人,安裝使用全部軟件是不太現(xiàn)實(shí)的。
    1、 對(duì)于普通實(shí)驗(yàn)人員,建議的軟件組合是:Reference Manager 9.0 Omiga 2.0 這已經(jīng)是最低要求了。如果以前使用過(guò)EndNote 和/或DNASIS,已經(jīng)順手不想改變的話(huà),當(dāng)然也可以用他們來(lái)代替相應(yīng)的軟件。
    2、 如果你的實(shí)驗(yàn)分析和設(shè)計(jì)需要上述各種專(zhuān)項(xiàng)功能的話(huà),再加上相應(yīng)功能的推薦軟件。
    3、 作者建議一般人員安裝的軟件除Reference Manager 9.0和Omiga 2.0外,最好也裝下列軟件:Gene Construction Kit 2.0; RasMol 2.7.1; Primer Premier 4.1; DNAssist 1.0。這些軟件能夠基本滿(mǎn)足對(duì)DNA進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)人員的需求。

    六、我怎么獲得這些軟件?
    既然已經(jīng)知道軟件的名稱(chēng),當(dāng)然用搜索引擎去查找,然后從各軟件的網(wǎng)站獲得最新版本的軟件。而且每個(gè)網(wǎng)站有自己軟件的詳細(xì)介紹。

    七、使用中遇到問(wèn)題怎么辦?
    要是該軟件提供售后服務(wù)的話(huà),找軟件出品公司。
    沒(méi)有公司的售后服務(wù)也不要緊,可以找自己?jiǎn)挝坏母呤只驈堎N在BBS上。
    要是再不行,就加入郵件討論列表,或是寫(xiě)信問(wèn)可能可以回答的人。

    下面是未修改過(guò)的文章

    在互聯(lián)網(wǎng)上,有很多軟件可以解決分子生物實(shí)驗(yàn)人員從立項(xiàng)到最后寫(xiě)論文的實(shí)際問(wèn)題。本文提供了對(duì)相同作用的很多軟件進(jìn)行比較后推薦給一線實(shí)驗(yàn)人員使用的軟件.

    一、資料收集整理階段。本階段需要查找某個(gè)專(zhuān)題的文章,并寫(xiě)出對(duì)該專(zhuān)題的綜述,以便對(duì)自己所要做的課題的現(xiàn)狀有一個(gè)基本的了解。
    推薦軟件:Reference Manager 9.0
    優(yōu)點(diǎn):可以在線通過(guò)查找關(guān)鍵詞搜索PubMed和609個(gè)Z39.50數(shù)據(jù)庫(kù)中的專(zhuān)業(yè)資料,保存查找的資料為本地文件。資料內(nèi)容和記錄分上下兩個(gè)屏幕,如有全文或想連接網(wǎng)絡(luò)時(shí)點(diǎn)擊一個(gè)鍵就可以到相應(yīng)的全文文章和摘要。可以直接在WORD中查找資料,插入引用,并在文章中對(duì)引用格式化,引用的參考資料格式有很強(qiáng)的用戶(hù)自定義功能,可以符合各種雜志對(duì)引用格式的要求,引用時(shí)不用多窗口切換。
    缺點(diǎn):沒(méi)有非常明顯的缺點(diǎn)。
    同類(lèi)參考軟件:Endnote 3.1.2

    二、序列分析、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)階段。本階段包括限制酶分析、引物設(shè)計(jì)、同源序列比較、質(zhì)粒作圖、結(jié)構(gòu)域(motif)查找、RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析、克隆策略圖譜、三維結(jié)構(gòu)顯示等方面的內(nèi)容。
    1、 綜合性軟件。這類(lèi)軟件要求對(duì)本階段上述的大部分功能均具備,但這類(lèi)軟件大多在專(zhuān)項(xiàng)分析上沒(méi)有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。
    推薦軟件:Omiga 2.0
    優(yōu)點(diǎn):你所能想到的大部分對(duì)核酸蛋白的序列分析功能,它大多具備。而且有很舒適的表達(dá)方式。不喜歡裝備各種專(zhuān)業(yè)性強(qiáng)的軟件,而希望用一個(gè)綜合性的軟件代替的同志可以選擇本軟件。本階段的大部分功能它都有。另外,該軟件還提供了一個(gè)很有特色的類(lèi)似于核酸限制酶分析的蛋白分析,對(duì)蛋白進(jìn)行有關(guān)的多肽酶處理后產(chǎn)生多肽片段。
    缺點(diǎn):文件實(shí)在太大了。要完全下載所有有關(guān)軟件的話(huà),需近30M,而且每個(gè)功能并不十分完美,只能說(shuō)可以解決問(wèn)題。
    同類(lèi)參考軟件:DNASIS 2.5 DNATools 5.1
    2、 限制酶分析。可能是最簡(jiǎn)單的功能了,其實(shí)我們用普通的文本搜索也能找出相應(yīng)的序列位點(diǎn)。不過(guò),正因?yàn)槿绱耍晕覀兿M浖诮Y(jié)果輸出上有更完美的表現(xiàn)。
    推薦軟件:DNAssist 1.0
    優(yōu)點(diǎn):雖然能進(jìn)行限制酶分析的軟件多如牛毛,但可以說(shuō)本軟件幾乎是唯一合格的限制酶分析軟件。原因是大多軟件只對(duì)線性序列進(jìn)行分析,那么cNNNNN…NNNgaatt環(huán)狀的序列就找不到EcoR I的位點(diǎn)。而這個(gè)軟件是唯一能非常簡(jiǎn)單地達(dá)到這個(gè)目的把這個(gè)EcoR I位點(diǎn)找出來(lái)的軟件。另外DNAssist在輸出上非常完美,除了圖形、線性顯示外,還有類(lèi)似DNASIS的列表方式,列出有的位點(diǎn)(按酶排列,按堿基順序排列)、沒(méi)有的位點(diǎn)。可以說(shuō)限制酶分析上該軟件是當(dāng)之無(wú)愧的冠軍。
    缺點(diǎn):顯示結(jié)果是黑白的,不是非常亮麗。
    同類(lèi)參考軟件:Primer Premier 4.1 其他多種軟件
    3、 引物設(shè)計(jì)。由于引物設(shè)計(jì)大多在原來(lái)的序列上設(shè)計(jì),因此能否對(duì)假定的引物進(jìn)行各種屬性的分析,參考各種結(jié)果,最后找到合適的引物序列便成為選擇軟件的最關(guān)鍵。
    推薦軟件:Primer Premier 4.1
    優(yōu)點(diǎn):顧名思義,該軟件就是用來(lái)進(jìn)行引物設(shè)計(jì)的。可以簡(jiǎn)單地通過(guò)手動(dòng)拖動(dòng)鼠標(biāo)以擴(kuò)增出相應(yīng)片段所需的引物,而在手動(dòng)的任何時(shí)候,下面顯示各種參數(shù)的改變和可能的二聚體、異二聚體、發(fā)夾結(jié)構(gòu)等。也可以給定條件,讓軟件自動(dòng)搜索引物,并將引物分析結(jié)果顯示出來(lái)。而且進(jìn)行這些操作非常簡(jiǎn)單。
    缺點(diǎn):沒(méi)有明顯缺點(diǎn)
    同類(lèi)參考軟件:DNAClub、 Oligo 5.0
    4、 同源序列比較。與限制酶分析相似,由于這類(lèi)軟件的內(nèi)核大都是相同的。所以其結(jié)果輸出和易用性也成了更重要的標(biāo)準(zhǔn)。
    推薦軟件: GeneDoc 3.2
    優(yōu)點(diǎn):用亮麗的色彩來(lái)區(qū)分相互間序列的同源性,輸出的格式一目了然,而且可以報(bào)告為進(jìn)化樹(shù)的格式。選擇項(xiàng)多,可以達(dá)到所需的要求。
    缺點(diǎn):要完全掌握,并不是很輕松的事。
    同類(lèi)參考軟件:MACAW 2.05 Clustal W Blast等
    5、 質(zhì)粒作圖。與限制酶分析一樣,這也是最常用的功能。很顯然,要求軟件對(duì)已知序列自動(dòng)作圖,對(duì)未知序列但關(guān)鍵部位位置清楚的質(zhì)粒也能作圖。主要是標(biāo)示各種酶切位點(diǎn)、基因序列、特定結(jié)構(gòu)域序列。
    推薦軟件:Gene Construction Kit 2.0
    優(yōu)點(diǎn):符合上述對(duì)質(zhì)粒作圖的所有要求,而且做出來(lái)的圖可以用到下面要講到的克隆策略圖譜中去。
    缺點(diǎn):使用實(shí)在太不方便了。
    參考軟件:Winplas 2.6 pDRAW32 1.0.33 等
    6、 結(jié)構(gòu)域(motif)查找。與限制酶的分析相似,這也是一個(gè)文本查找的內(nèi)容,關(guān)鍵在于以何種方式顯示查詢(xún)結(jié)果。
    推薦軟件:Primer Premier 4.1
    優(yōu)點(diǎn):該軟件在結(jié)構(gòu)域查找和限制酶查找一樣,結(jié)果以圖形、表格、序列三種方式提供,而且提供了不存在的的結(jié)構(gòu)域的列表。軟件本身提供了大量的結(jié)構(gòu)域序列。
    缺點(diǎn):對(duì)于環(huán)狀的序列好象也無(wú)法解決末端結(jié)構(gòu)域的查找問(wèn)題(與限制酶分析類(lèi)似)。 其他參考軟件:沒(méi)有很出色的競(jìng)爭(zhēng)軟件
    7、 序列查找下載工具。
    推薦軟件:Network Entrez
    優(yōu)點(diǎn):該軟件是一個(gè)客戶(hù)端程序,需在聯(lián)網(wǎng)時(shí)使用,可以查詢(xún)核酸、蛋白、基因、三維結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)。雖然現(xiàn)在大家可以直接到相應(yīng)的網(wǎng)址查詢(xún)序列,但有一個(gè)將各分散的不同站點(diǎn)序列查詢(xún)集合在一起的軟件是否更適合你呢?
    缺點(diǎn):對(duì)實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),還不是能簡(jiǎn)單上手的。而且如果不上網(wǎng)的話(huà),還真是一點(diǎn)用處也沒(méi)有。軟件作用太專(zhuān)一了。
    其他參考軟件:無(wú)
    8、 RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及分析。一旦碰到二級(jí)結(jié)構(gòu)分析和預(yù)測(cè)的時(shí)候,好象各個(gè)軟件都事先約好似的,只能在mac和unix下使用,在windows下用的實(shí)在太少了。而且似乎人們?cè)诙?jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)方面也沒(méi)有什么明確的模型。因此,對(duì)這類(lèi)軟件只能以參考參考的心態(tài)來(lái)使用了,不能報(bào)任何希望。
    推薦軟件:RNAdraw 1.1b2
    優(yōu)點(diǎn):軟件真可謂短小精悍,如此小的軟件,竟然能將我們想知道的各種參數(shù)計(jì)算出來(lái)。與其競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手RNAStructure 3.5 相比,功能并沒(méi)有少了什么。
    缺點(diǎn):大多數(shù)功能通過(guò)右鍵彈出菜單進(jìn)行,對(duì)普通人員不太慣。
    參考軟件:RNAStructure 3.5
    9、 蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析。不要指望軟件能給你帶來(lái)一個(gè)有三維結(jié)構(gòu)的蛋白(不然,做NMR,X射線衍射的人不都失業(yè)了)。所謂的分析只能給你一個(gè)蛋白某些片段有形成什么結(jié)構(gòu)的趨向。結(jié)果還是要靠人本身。
    推薦軟件:Antheprot 4.5
    優(yōu)缺點(diǎn):由于沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手,難以比較,實(shí)在無(wú)所謂優(yōu)缺點(diǎn)了。該軟件能夠提供蛋白序列的一些二級(jí)結(jié)構(gòu)信息,以便于我們對(duì)未知結(jié)構(gòu)蛋白的結(jié)構(gòu)做個(gè)假想。
    參考軟件:沒(méi)有
    10、 克隆策略圖譜。幾乎所有人都用手工或用繪圖軟件來(lái)畫(huà)出整個(gè)克隆過(guò)程,各種位點(diǎn)只能大概估計(jì),與核酸的序列之間的關(guān)系當(dāng)然無(wú)從談起。現(xiàn)在終于有可以解決問(wèn)題的軟件登陸了。
    推薦軟件:Gene Construction Kit 2.0
    優(yōu)點(diǎn):可以將載體與目的基因各自進(jìn)行適當(dāng)?shù)南拗泼盖泻煤螅B接成新的載體-基因。可以將整個(gè)克隆過(guò)程用圖示方式表示出來(lái)。可以根據(jù)適當(dāng)?shù)膍arker將電泳圖畫(huà)出來(lái)(而且可以和掃描的實(shí)際結(jié)果對(duì)照)。整個(gè)過(guò)程相當(dāng)于模擬一個(gè)克隆過(guò)程,還沒(méi)開(kāi)始做實(shí)驗(yàn),就大致知道實(shí)驗(yàn)的結(jié)果了。提供了一個(gè)相當(dāng)詳細(xì)的教學(xué)文件。更何況如前所述,它還是一個(gè)優(yōu)秀的質(zhì)粒作圖軟件。
    缺點(diǎn):要使用它,實(shí)在需要重新學(xué)習(xí)。雖然使用較難,看在有詳細(xì)教學(xué)文件和功能急需及強(qiáng)大的份上,也是非常值得的。
    參考軟件:沒(méi)有
    11、 三維結(jié)構(gòu)顯示。用各種方法計(jì)算出來(lái)的各種三維結(jié)構(gòu)的數(shù)據(jù)只有在相關(guān)軟件幫助的情況下,才能顯示出其本來(lái)面目,使得我們對(duì)這些分子的結(jié)構(gòu)有一個(gè)直觀的體會(huì)。
    推薦軟件:RasMol 2.7.1
    優(yōu)點(diǎn):程序短小,功能強(qiáng)大。尚無(wú)在功能上出其右者。其顯示窗口可以很簡(jiǎn)單通過(guò)選擇相應(yīng)的菜單來(lái)顯示分子的三維結(jié)構(gòu)。用命令行窗口,通過(guò)輸入命令可以執(zhí)行和顯示復(fù)雜和要求極高的三維圖形。
    缺點(diǎn):在擁有強(qiáng)大功能的命令行窗口使用命令時(shí),需記住大量的命令,還要對(duì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)有了解,太難了,簡(jiǎn)直又進(jìn)入了DOS時(shí)代。
    參考軟件:ICMlite 1.0 Cn3D
    說(shuō)明:三維結(jié)構(gòu)顯示有一個(gè)軟件是瀏覽器插件,就是Chime 2.0 ,它與其他三維結(jié)構(gòu)顯示的作用有些不同,需與瀏覽器一起起作用。
    12、 格式轉(zhuǎn)換。各種軟件為了自己軟件的需要有不同的格式,對(duì)我們使用數(shù)據(jù)帶來(lái)了困難。好在我們有格式轉(zhuǎn)換軟件。
    推薦軟件:Seqverter 1.3
    優(yōu)點(diǎn):使用簡(jiǎn)單,填寫(xiě)輸入文件和輸出文件名就可以完成格式轉(zhuǎn)換。而且能夠轉(zhuǎn)換的格式非常之多。可在線升級(jí)以讀寫(xiě)更多格式文件。
    參考軟件:Visual Sequence Editor 1.1

    三、實(shí)驗(yàn)操作階段和分析。本階段由于各實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備和方法的不同差異太大,如若用到軟件,請(qǐng)參考機(jī)器配備之軟件。但也有一些共同的要求和使用的軟件。
    1、 電泳條帶定量分析。
    推薦軟件:無(wú)
    實(shí)在沒(méi)有什么通用的電泳膠條帶定量分析軟件符合我們的要求。我們希望軟件能自動(dòng)手動(dòng)找到條帶、進(jìn)行定量分析。甚至在手動(dòng)指定條帶的情況下,可以自動(dòng)讀出測(cè)序膠的序列。很遺憾,即使是比較大型的讀膠系統(tǒng)也不能完成滿(mǎn)意的定量分析。
    參考軟件:band leader 3.0
    2、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析作圖。可能在某些情況下需要用到這類(lèi)軟件。由于專(zhuān)業(yè)的統(tǒng)計(jì)軟件也很多,比較出色。我們只推薦一個(gè)比較適合生物的軟件GraphPad Prism 3.0

    四、文章寫(xiě)作和發(fā)表。本階段主要是對(duì)所獲得的結(jié)果整理,并發(fā)表在合適的地方。
    1、 文獻(xiàn)引用。
    推薦軟件:Reference Manager 9.0
    優(yōu)點(diǎn):可以自動(dòng)將文章中的各種文獻(xiàn)引用按不同期刊的要求排列,在期刊間轉(zhuǎn)換只需幾秒鐘。寫(xiě)文章時(shí)會(huì)在word中將查找到相應(yīng)的文獻(xiàn)列出,方便寫(xiě)作。
    參考軟件:EndNote 3.1.2
    2、 生成出版質(zhì)量的圖片。發(fā)表時(shí),對(duì)用到的分子結(jié)構(gòu)的圖片質(zhì)量要求較高,直接從RasMol等軟件中截取的圖片質(zhì)量不夠精美。
    推薦軟件:Pov-Ray for Windows 3.1
    優(yōu)點(diǎn):軟件相當(dāng)于一種語(yǔ)言,修改pov格式文件,可以定義光源、攝像機(jī)、材質(zhì)、陰影等因素,把生物分子的表面用材質(zhì)填充,根據(jù)光源、攝像機(jī)得到分子三維圖的一個(gè)角度的圖。分辨率最大可達(dá)1280*1024。圖象質(zhì)量相當(dāng)精美。
    缺點(diǎn):難以使用。而且用的是自己的格式。好在有一個(gè)叫povchem的輔助軟件可以將最常見(jiàn)的pdb格式文件轉(zhuǎn)為pov格式。
    參考軟件:molmol 2.5.1 mole 1.1.8
    3、 序列遞交。要是結(jié)果中有新的序列需要遞交到各大數(shù)據(jù)庫(kù)中必須符合各數(shù)據(jù)庫(kù)的要求。除了下面推薦的軟件外,也可以通過(guò)寫(xiě)好一種格式后,用格式轉(zhuǎn)換軟件轉(zhuǎn)換為其他種類(lèi)格式,以向不同的數(shù)據(jù)庫(kù)遞交序列。
    推薦軟件:Sequin 2.90
    優(yōu)點(diǎn):向GenBank、EMBL、DDBJ三大核酸序列庫(kù)遞交序列。可以不用仔細(xì)考慮各數(shù)據(jù)庫(kù)文件的具體格式,以問(wèn)答填表格的形式,將需遞交的序列和相關(guān)資料填好。可以在線直接發(fā)送,也可以生成相應(yīng)格式文件,以email形式發(fā)送。
    缺點(diǎn):一步一步填表的方式對(duì)新手固然好,但沒(méi)有高級(jí)使用的方式,可能用的多的人會(huì)覺(jué)得太死板。好在也沒(méi)有人經(jīng)常遞交序列的。
    參考軟件:無(wú)

    五、我究竟要裝哪些軟件?
    很顯然,對(duì)于各個(gè)不同的人,安裝使用全部軟件是不太現(xiàn)實(shí)的。
    1、 對(duì)于普通實(shí)驗(yàn)人員,建議的軟件組合是:Refenence Manager 9.0 Omiga 2.0 這已經(jīng)是最低要求了。如果以前使用過(guò)EndNote和/或DNASIS,已經(jīng)順手不想改變的話(huà),當(dāng)然也可以用他們來(lái)代替相應(yīng)的軟件。
    2、 如果你的實(shí)驗(yàn)分析和設(shè)計(jì)需要上述各種專(zhuān)項(xiàng)功能的話(huà),再加上相應(yīng)功能的推薦軟件。
    3、 作者建議一般人員安裝的軟件除Reference Manager 9.0和Omiga 2.0外,最好也裝下列軟件:Gene Construction Kit 2.0; RasMol 2.7.1; Primer Premier 4.1; DNAssist 1.0。這些軟件能夠基本滿(mǎn)足對(duì)DNA進(jìn)行操作的實(shí)驗(yàn)人員的需求。

    六、我怎么獲得這些軟件? 既然連軟件的名稱(chēng)都知道了,還不知道如何從網(wǎng)絡(luò)獲得?當(dāng)然用搜索引擎去查找,然后從各軟件的網(wǎng)站獲得最新版本的軟件。而且每個(gè)網(wǎng)站有自己軟件的詳細(xì)介紹。

    七、使用中遇到問(wèn)題怎么辦?
    要是該軟件提供售后服務(wù)的話(huà),當(dāng)然找軟件出品公司。
    沒(méi)有公司的售后服務(wù)也不要緊,自己?jiǎn)挝徊皇怯懈呤趾虰BS嗎?
    要是再不行,就加入郵件討論列表,或是寫(xiě)信問(wèn)可能可以回答的人。

     
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