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    【匯總】致病菌常見問題解答

    放大字體  縮小字體 發布日期:2020-08-17  來源:食品微生物檢驗公眾號
    核心提示:Q、1、關于分離平板如何分離劃線?A分離平板劃線最好采用分區劃線的方法,目的是將不同菌分離開,便于后續挑取單菌落鑒定。根據增

    Q、1、關于分離平板如何分離劃線?
    A

    分離平板劃線最好采用分區劃線的方法,目的是將不同菌分離開,便于后續挑取單菌落鑒定。根據增菌液濃度決定不同區之間是否需要燒環或者更換接種環,保證菌落不會過密集或者過于稀疏。

    Q

    2、選擇性分離平板上有的不長菌,有的有典型菌落,如何判斷?


    A

    標準中為了避免漏檢,選用了兩種或兩種以上的選擇性分離平板。由于不同種類的沙門在平板上生長有差異,所以某些沙門氏菌會出現在某一種平板上生長,其他平板不生長或者生長不典型的情況。根據標準,任何一種分離平板上出現可疑菌落都需要進行后續的鑒定,不能直接判定。根據后續生化和血清結果再報告檢出或者未檢出。

    Q

     

    3、培養基滅菌前后如何測定pH?


    A

    培養基pH值測定是完全溶解,滅菌后,冷卻至25℃進行測量。我司不推薦滅菌前測定,因為滅菌過程中,溫度和成分間的化學反應,會影響pH值。所以,推薦客戶滅菌冷卻后測量。如果是含瓊脂的培養基可以采用固體電極進行測量。

    Q

    4、血清學鑒定時H血清鑒定使用的半固體瓊脂配置及挑菌問題


    A

    轉接半固體培養后,由于瓊脂含量低、平板軟,所以建議采用一次性接種環輕輕刮取擴散邊緣菌苔進行后續操作。金屬接種環質地堅硬容易戳破瓊脂。

    Q

    5、血清學鑒定是否需要做分型?


    A

    按照標準要求報告結果只需報告檢出或未檢出沙門氏菌,不需要報告具體血清型,所以只需要做O多價和H多價就可以了。如果需要后續進行分型,需要購買群血清及單因子血清。

    Q

    6、生化鑒定使用的菌懸液濁度要求?


    A

    生化鑒定套裝為微量鑒定系統,對于菌懸液濃度有要求。使用0.5M濁度進行接種。菌懸液濃度過大或者過小對實驗結果的準確度有影響。

    Q

    7、鼠傷寒沙門氏菌接種三糖鐵瓊脂斜面變黑的問題?


    A

    可能是由于接種量過大或者培養時間過長導致的,建議減少接菌量或縮短培養時間。

    Q

    8、BPW在增菌時必需加熱到44℃嗎?室溫的溫度可以增菌嗎?


    A

    培養基預熱至44℃主要目的是保證乳粉的充分溶解,室溫條件下加入樣品可能會導致部分樣品聚集成團,不易溶解。

    Q
    9、TSA平板上的可疑菌落沒有產黃色素也有可能是阪崎嗎?為什么TSA要25℃培養? 
    A

    10、不同克羅諾桿菌的產黃色素能力不同,并且有文獻報道約10%的克羅諾菌屬的菌株不具有產黃色素的能力,所以僅根據產黃色素進行判定會有漏檢的情況,建議結合生化試驗進行判斷。在25℃時更易觀察黃色素的產生,溫度過高黃色素顏色會變淡(出自《伯杰氏細菌手冊》)。

    Q
    11、怎么控制0.5麥氏濁度呢?  
    A

    根據我們生化干制套裝中提供的0.5麥氏濁度比濁管作為參比,也可以選用濁度儀。

    Q

    12、為什么用同一株標準菌株 ATCC29544 做陽性添加后做阪崎干制時西蒙氏檸檬酸有陰性也有陽性?

    A

    如果操作正確,保證菌株活性及純度的情況下,ATCC29544 這株模式菌株的西蒙氏檸檬酸鹽反應應該呈現陽性。

    Q
    13、乳粉檢驗中用哪一種顯色培養基好?如何選擇?
    A

    ESM015可以進行準確的篩選,相比較而言ESM016 培養基上生長的菌株特異性更強,結果更易觀察。

    Q
    14、為什么這么多溫度呢?不同溫度的作用能明確嗎?
    A

    不同過程的溫度的作用是不一樣的。BPW進行36±1℃,主要是為了使得產品中的微生物進行復蘇;選擇性增菌44±0.5℃是為了提高選擇性;TSA 25℃利于黃色素的產生;生化試驗30℃是為了提供適宜的溫度更利于目標菌的生長并觀察生化反應。

    Q
    15、ESM015培養基對陰溝腸桿菌的選擇性效果? 
    A

    目前我們實驗室的陰溝腸桿菌標準菌株在ESM015上為白色菌落,但是1%的陰溝腸桿菌是具有α-葡萄糖苷酶的活性,所以極少的陰溝腸桿菌也會呈現藍綠色菌落。

    Q
    16、請問兩種檢測方法該如何選擇呢?
    A

    根據限量標準進行選擇,目前限量標準中要求一段奶粉進行定量檢測。

    Q
    17、在檢測過程中陽性對照用ATCC29544 那有陰性對照嗎 ?
    A

    陰性對照試驗不用全過程添加,只需在部分生化實驗時添加陰性對照菌株。

    Q
    18、萬古霉素的添加可以不過濾嗎?
    A

    我公司成品萬古霉素已經過過濾除菌,可直接使用,如果自行配制建議進行過濾除菌。

    Q
    19、阪崎腸桿菌檢出,可以原樣復檢嗎?原樣復檢咋又檢不出了?
    A

    由于微生物的數量和分布不均勻導致,微生物不能復檢。

    Q
    20、自立袋封上后是否制造了無氧環境?阪崎腸桿菌還能很好的生長嗎?
    A

    21、自立袋的封口不會造成無氧環境,阪崎腸桿菌能夠正常生長。

    Q
    22、如果DFI滅菌后有黑色沉淀能繼續使用嗎?有什么影響嗎?
    A

    培養基高壓前進行煮沸即可避免黑色沉淀的產生。

    編輯:songjiajie2010

     
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